Vacuna contra el SIDA reunión del subcomité de investigación

Llama para ordenar

actividades posteriores a la Cumbre en la vacuna y los planes

La vacuna contra el Subcomité de Investigación del SIDA (AVRS De) se reunió en sesión pública los días 16-17 de septiembre de 2008, en el Natcher Conference Center en el campus de bierno theernment) en Bethesda, MD.

RAV miembros presentes: Eric Hunter (silla), James Bradac (secretario ejecutivo), Jay Berzofsky (oficio), Larry Corey (oficio), Susan Buchbinder, Deborah Birx, Kevin Fisher, Barton Haynes (oficio), Paul Johnson, Jeffrey Lifson, Margaret Liu, Bonnie Mathieson (oficio), Nelson Michael (de oficio), Gary Nabel (oficio), Louis Picker, Nina Russell, Jerald Sadoff, Jack Whitescarver (oficio).

Descripción y planes para el recién formado Descubrimiento de Vacunas Branch (VDB)

el personal Otherernment participantes

Taller sobre primates no humanos para la investigación vacuna contra el SIDA

altavoces

El Dr. Hunter abrió la sesión a la orden y pidió a los miembros del comité y los observadores que se presenten.

Discusión

Peggy Johnston informó que aún se están analizando los resultados del ensayo STEP, con resultados finales que se entregarán en la reunión Vacuna contra el SIDA de 2008 en Ciudad del Cabo 13-15 de octubre. Sin embargo, los resultados preliminares apuntan a un fallo del producto y plantean preguntas sobre el concepto. Con base en las recomendaciones de este grupo y otros, el Dr. Anthony Fauci tomó la decisión de no continuar con el ensayo PAVE 100 de la vacuna candidata Centro de Investigación (VRC) (como se indica en la Ciencia (25 jul 2008). Una cumbre fue organizada por la vacuna theernment liderazgo en marzo, 2008and el amplio consenso alcanzado por los miembros de la comunidad de investigación fue la necesidad de volver “volver a lo básico”, con un nuevo énfasis en la investigación de descubrimiento, con prioridades en seis áreas

También habrá un mayor énfasis en la necesidad de nuevos investigadores jóvenes.

Atender las necesidades de la comunidad de investigación

theernment utilizaremos iniciativas dirigidas a reforzar la investigación del descubrimiento de la vacuna contra el VIH y ha reorganizado el Programa de Investigación de Vacunas en consecuencia, la adición de una rama con el descubrimiento de vacunas Jorge Flores como jefe en funciones. theernment pondrá en marcha una iniciativa para Basic Vacuna contra el VIH Descubrimiento, con subvenciones R01 por un total de $ 10 millones en el primer año, con un RFA publicado en agosto de 2008 y plazo de solicitud el 10 de noviembre Además, theernment financiará una iniciativa de tecnologías altamente innovadoras para interrumpir la transmisión del VIH (HIT-IT), con subvenciones R01 total de $ 4 millones en el año 1 y un plazo de 5 de enero Ambas iniciativas harán sus primeros premios en julio de 2009. Johnston también anunció una nueva Red de Biología de células B del VIH-1 Vacuna desarrollo y un Programa de Premio a la Innovación por fases para la Investigación de Vacunas del SIDA, que se han aprobado para el año fiscal 2010.

Johnston resume los avances recientes en las seis áreas prioritarias, lo que sugiere que estos pueden ser vías fructíferas de la investigación, y anunció que el Comité Asesor de Investigación sobre el SIDA (ARAC) ha dado permiso para extender el Programa de Vacunas contra el VIH Investigación y Diseño (HIVRAD), que apoya -descubrimiento relacionado con la investigación preclínica que será relevante para estas prioridades. DAIDS está trabajando con sus socios para apoyar y mejorar el trabajo en modelos animales, con un taller sobre los primates no humanos (NHP) de Noviembre 12-13 otro sobre la biología de sistemas, el 9 de diciembre, en relación con el 26 Simposio Anual de NHP Modelos para el SIDA . Los cambios en la agenda científica de la Ensayos de Vacunas contra el VIH (HVTN) incluirán un mayor énfasis en los estudios para explorar correlaciones de protección inmunitaria, las mejoras en los estudios PHN, mejores ensayos de las células T y las funciones de anticuerpos, y una mejor comprensión de STEP y datos Phambili , con el objetivo de aumentar las respuestas de la mucosa y la amplitud y la magnitud de las respuestas de células T. Estas nuevas actividades de descubrimiento serán financiados principalmente mediante la reducción o la reorientación de la financiación de las actividades de desarrollo.

En respuesta a las preguntas, Johnston afirmó que el nivel de financiación para las nuevas iniciativas de descubrimiento podría ser tanto como $ 100 millones durante los próximos cinco años; como las propuestas solicitadas, serán revisados ​​por theernment en lugar de la Oficina de Revisión Científica. No habrá nuevas solicitudes fabricación de la vacuna en 2009. Sin embargo, theernment mantendrá la capacidad de moverse rápidamente descubrimientos prometedores en modelos animales, fabricación y ensayos clínicos, cuando esté justificado. El desarrollo de nuevos modelos animales (distintos de los primates no humanos) será seguido de cerca por el nuevo Descubrimiento de Vacunas Branch y podría ser objeto de una futura reunión del AVRS De.

El protocolo PAVE 100 está siendo revisada y no será examinada de nuevo hasta después de enero de 2009. Varios miembros RAV indicaron que no tenían ningún deseo de hacer un refrito de la propuesta VRC por tercera vez – le dieron luz verde si no hay nueva información excepto para el diseño de los ensayos. Sin embargo, les gustaría un informe sobre el estado de PAVE 100 planes en su reunión de enero.

Jorge Flores caracteriza VDB como una nueva combinación de piezas y actividades existentes, dispuestos de manera que se fomente la más amplia colaboración posible y traer nuevos descubrimientos y tecnologías para influir en vacunas contra el SIDA. VDB desarrollará sus programas de becas en estrecha colaboración con otros programas de la DAIDS y divisiones theernment. La iniciativa básico Descubrimiento de Vacunas (BVD) está diseñado en parte para atraer a investigadores de otros campos, incluyendo nuevos investigadores, y para fomentar la investigación interdisciplinaria; la iniciativa HIT-IT está diseñado para obtener, conceptos innovadores no convencionales y no tendrá ningún requisito para los datos preliminares. Del mismo modo, la Red de Células B estimulará la creación de redes y el intercambio de conocimientos, reactivos y protocolos que hagan avanzar el campo. Además de los enfoques de sistemas, VDB también apoyará informática de descubrimiento para identificar y aplicar nuevos conocimientos de otros campos. Dado que los caminos tradicionales para el descubrimiento de la vacuna no parecen ser aplicables al descubrimiento de vacunas contra el VIH, VDB fomentará el desarrollo de un nuevo camino basado en una comprensión más profunda de los mecanismos patogénicos e inmunológicos.

En respuesta a las preguntas, Flores agregó que VDB, como el resto de theernment andernment, se enfrenta al problema de aumento de los derechos sin aumentos de personal, lo que plantea desafíos para la comunicación y la colaboración. la estructura y las actividades de VDB están destinados a ser un nuevo mecanismo para la captura y la síntesis de nueva información relevante para el descubrimiento de vacunas contra el VIH y el desarrollo. theernment ha reprogramado algunos fondos para estas actividades, pero Flores espera que las ONG se enfrentará a una parte del desafío e incluso financiar algunas de las ideas de forma independiente. Estuvo de acuerdo en que será necesaria una piscina flexibles de dinero para perseguir descubrimientos prometedores; esto puede hacerse a través de suplementos competitivos, ya sea solo o en cooperación con Gates y IAVI. Las dos nuevas iniciativas financiará un total de 25 o 30 proyectos en los próximos años, y será muy interesante ver qué resulta de este esfuerzo.

Nancy Miller revisó las prioridades de la investigación NHP que fueron propuestas en la Cumbre de Vacunas

Un taller de post-cumbre que se celebrará 12-13 de noviembre de refinar estas prioridades y responder a tres preguntas centrales

En el taller de hoy, que esperaba para participar en AVRS De éstos y tres preguntas adicionales

Jeffrey Lifson recordó a los participantes que hay más de un modelo NHP del SIDA, sino más bien una serie de modelos PHN, y que el objetivo debe ser un mejor modelo NHP. En los seres humanos, el VIH es una infección de xenobióticos relativamente reciente (y altamente patógena). Los tres anfitriones “naturales” a SIV son monos verdes africanos, el mangabey tiznado, y el chimpancé. Cada especie tiene su propia versión de SIV, pero en todos los casos SIV es una infección fatal es una especie que ha co-evolucionado con el virus durante millones de años. En macacos, por otra parte, la infección con cualquiera de SIV o de VIH produce enfermedad que se ve y actúa muy parecido a SIDA. Como resultado, el “modelo” NHP del VIH consiste en una NHP específica, infectado por un virus específico, que se manifiesta como una enfermedad específica, y tiene específico (pero nunca universal) aplicabilidad a la enfermedad humana. Diferentes modelos tienen sus puntos fuertes y débiles, y es vital para seleccionar el mejor modelo para la cuestión científica de interés (por ejemplo, patogenia, terapia, profilaxis).

Además, el VIH no infecta productivamente PNS en cualquier forma experimental útil, por lo que el modelo actual implica que infectan a los macacos (uno de tres especies) con SIV o el Shiv híbrido. Los investigadores han definido la historia y características del SIV encontrada en colonias de Estados Unidos, que a través de pases en serie han evolucionado varios fenotipos patógenos. VIHS, por otra parte, prolifera y luego se extingue, a pesar de que proporciona un modelo lo suficientemente bueno para algunos diseños experimentales. La selección de una u otra implica una solución de compromiso entre la carga viral y el tiempo de progresión. Los imitadores resultantes de infección por VIH fielmente en tanto sus efectos directos (agotamiento de las células T CD4 + en el intestino), sino también en sus efectos indirectos (depósitos de colágeno y la alteración de los tejidos linfáticos). El fenómeno de los “controladores de élite” también se refleja en este modelo. Además, los investigadores tienen actualmente tanto los anticuerpos y ensayos necesarios para estudiar la neutralización de SIV, aunque en la actualidad estas herramientas no son lo suficientemente amplia para reflejar la diversidad de aislados de VIH.

En el uso de primates no humanos para probar vacunas contra el VIH, la dificultad es seleccionar un modelo de NHP que es lo bastante rigurosa, sin ser demasiado estricto. Hay varios modelos de NHP (más cada día), y los investigadores tienen que elegir el modelo adecuado para la cuestión que nos ocupa, igualando al estudio específico. Este consiste en elegir no sólo el derecho NHP y el virus de la derecha, sino también el desafío derecha (tanto sitio y inóculo), el número correcto de retos, y el criterio de valoración clínico adecuado (s). Además, una vacuna podría tener éxito en un mono pero fallan en un hombre, del mismo modo que podría fallar en el mono, pero tener éxito en un hombre – el valor predictivo de un modelo animal sólo puede ser demostrada cuando la vacuna también ha demostrado su eficacia clínica en humanos.

Louis Selector informó que el modelo PHN no es más que un sustituto de preclínico para los seres humanos. SIV en macacos (SlVmac) es una “reconstrucción convincente” del VIH en los seres humanos, más fiel a la enfermedad humana que casi cualquier otro modelo animal. Por esta razón, “este modelo (o más bien, los modelos) tiene la capacidad de revelar los mecanismos fundamentales de la inmunidad humana y la patogénesis – mecanismos que informar críticamente desarrollo terapéutico.” La dinámica viral son los mismos, al igual que la desregulación de la sustitución de las células CD4 + y la regeneración, escape mutacional de la respuesta inmune, y las infecciones oportunistas (IOs) con la misma u homólogas organismos. Los acontecimientos cruciales en ambas infecciones revelan un fallo progresivo de la homeostasis: SIV y la infección por VIH inicia una hiperproliferación persistente entre las células CD4 + y T CD8 +, lo que sin embargo deteriora con el tiempo hasta que el anfitrión es susceptible a las infecciones oportunistas.

Como resultado, el modelo de NHP puede proporcionar una guía confiable para la investigación del VIH. Por ejemplo, los experimentos con “naïve deficientes” (atímicos) macacos han demostrado que el compartimento CD4 + naïve no juega un papel crucial en el mantenimiento de el compartimiento de memoria central en la infección por SIV. Esto a su vez se centra la atención en la nueva CD4 + población de memoria central y los factores que regulan su homeostasis, tales como IL-7. Del mismo modo, los macacos en la que las poblaciones de CD8 + se agotaron con anticuerpos monoclonales (mAbs) mostraron mayores cargas virales y progresión de la enfermedad más rápida que los controles. Además, CD8 + agotamiento también indujo un aumento repentino de la proliferación de células de memoria T efectoras CD4 + en la sangre, aumentando notablemente el número de objetivos de SIV “óptimas” tal como la replicación viral está aumentando. En este y otros casos, el modelo NHP permite a los investigadores a diseccionar experimentalmente estos mecanismos complejos de forma que no se podía hacer en los seres humanos.

El modelo NHP sólo ha comenzado a demostrar su valor para delinear los mecanismos inmunes, y el desarrollo y la explotación de este modelo será caro. Sin embargo, la financiación básica para la investigación de primates se ha estancado desde hace muchos años, y la disponibilidad general de los animales está cayendo detrás de la demanda. Una importante inversión a largo plazo debe hacerse en instalaciones de cría y de infraestructura, así como la formación y desarrollo del modelo. A corto plazo, hay que preservar y centrarse experiencia NHP existente sobre las “grandes cuestiones” de la inmunología SIDA.

En respuesta a las preguntas, Picker añadió que la financiación NHP aumentó sólo un 9 por ciento durante la duplicación del presupuesto overallernment y se ha mantenido estable desde entonces. Otros experimentos con macacos no tratados previamente con deficiencia costaría alrededor de $ 350.000. La demanda está obligando a subir el precio de los macacos (actualmente cerca de $ 10.000 cada uno) y tardará años a la rampa encima de cría. Como resultado, un R01 beca para estudiar modelos de NHP (por ejemplo, la forma de manipular la inmunidad mucosal) representa una apuesta caro, pero el cambio a el ratón u otro modelo animal podría dar resultados engañosos. CNRR, por su parte, parece ser simpático, pero es incapaz de ayudar a menos que el nuevo énfasis en la investigación NHP hacia una vacuna contra el SIDA en los resultados de aumento de la financiación. Varios participantes señalaron que PNS representan una nueva y mejor manera de estudiar cómo una vacuna manipula el sistema inmunológico, ya que los resultados son más fácilmente validados en un modelo que permite el acceso de todo el cuerpo.

Guido Silvestri informó sobre los esfuerzos para comprender cómo los “huéspedes naturales” para controlar la infección SIV y la progresión, con la esperanza de la aplicación de dichos mecanismos para el VIH. Existen en la actualidad alrededor del 42 conocido “anfitriones naturales” y contando; su trabajo es con mangabeyes grises y su versión del virus, SIVsm. En mangabeyes grises, infección SIVsm no es seguida por la reducción de células T CD4 +, a pesar de una alta carga viral. Los investigadores también descubrieron que el recuento de células T CD8 + después de la infección SIVsm que en el caso en el VIH, lo que sugiere que la activación inmune atenuada reduce el número de células diana y de este modo protege contra la progresión. Puesto que la resistencia de un huésped natural es independiente de la respuesta inmune adaptativa, sin embargo, sería difícil para una vacuna para producir una respuesta protectora en un humano. Los investigadores también aprendido que las células CD4 + de hosts NHP tienen bajos niveles de CCR5, especialmente en el intestino, lo que sugiere que puede haber un conjunto de células “protegidos” CD4 + que no lo hacen en casa en en la inflamación relacionada con el SIV. Por último, mangabeyes grises han demostrado “exquisitamente resistente” a la transmisión vertical (madre a hijo), que puede ser la razón de la evolución de algunas de estas adaptaciones.

Sobre la base de estas y otras observaciones, Silvestri llegó a la conclusión de que la progresión a SIDA no es una consecuencia de la carga viral o la eliminación directa de las células por el virus, sino más bien el resultado de una disfunción global en el sistema inmunológico humano. Él planea seguir con esta investigación en modelos PHN utilizando enfoques de vacunas clásicas, pero que podría considerar enfoques alternativos si los modelos PHN están fuera de su alcance. Los recursos que faciliten este tipo de investigación incluyen el aumento de la financiación de los centros de primates, validación y estandarización de los ensayos y reactivos, secuencias genómicas completas de ambos animales huésped y virus, y los cambios en el estado de conservación de primates no humanos “en peligro de extinción” que pueden ser criados en cautividad para la investigación propósitos.

En respuesta a las preguntas, Silvestri agregó que uno de los objetivos de investigación sería para desacoplar CD4 + activación de la expresión de CCR5 – bajos de expresión de CCR5 bloquea la transmisión vertical, pero no horizontal, y el bloqueo de CCR5 bloqueará la transmisión del VIH, pero no SIV. Esto puede implicar correceptores, pero las vías de regulación de CCR5 son extremadamente complejas. Se necesitarán nuevos reactivos y estandarizados para explorar estos mecanismos moleculares.

Ronald Veazey dio ejemplos de los tipos de estudios que son posibles utilizando modelos NHP, incluyendo enfermedades infecciosas, terapéutica y estudios de drogas, y la inmunología. La principal desventaja de primates es el gasto: costes directos de entre los 4.200 y $ $ 7.000 por animal y los costos totales de tanto como $ 11.500 cada uno. Dependiendo de la especie, sin embargo, entre 93 y 98 por ciento de los genes NHP son similares a humano, y aproximadamente 75 por ciento de los anticuerpos humanos, quimiocinas y citocinas son de reacción cruzada en macacos. Además, la mayoría de los ensayos y los reactivos utilizados para estudiar el VIH también se pueden utilizar para estudiar SIV en macacos. Dadas las muchas similitudes entre SIV y el VIH (transmisión, patogenia, el colapso inmune, infecciones oportunistas, etc.), esto hace que sea posible hacer la investigación fundamental en primates no humanos que no se podía hacer en los seres humanos, incluyendo

Los estudios PHN ya han dado lugar a grandes avances, incluyendo el descubrimiento de que el intestino es el sitio principal de la replicación viral y la persistencia, la creación de un “gran reserva” de virus en el GALT en lugar de las PBMC. Tanto SIV y VIH preferentemente se replican en los tejidos de las mucosas, incluso en “controladores de élite” y no progresores, lo que sugiere que la estimulación de respuestas inmunes mucosas será importante para vacunas. Del mismo modo, las altas dosis de microbicidas tópicos que bloquean CD4 y / o CCR5 bloquea completamente la transmisión vaginal de SIV y VIH de unión, en ausencia de trauma o inflamación, lo que sugiere que la combinación de una vacuna que induce la memoria central y un microbicida vaginal podría proporcionar reforzado protección contra el VIH. Se necesitan estudios adicionales básicas en primates no humanos infectados con SIV para aclarar cuestiones pendientes y determinar las correlaciones de la inmunidad. En la actualidad, el correlato sólo se conoce de la protección es la preservación (o restauración) de las células T CD4 + de memoria intestinal, que “naturaleza” ha logrado cambiando el sistema inmunológico de que no progresa hosts para tolerar la infección persistente.

Norman Letvin dirigió el valor predictivo de los estudios de inmunogenicidad PHN, en particular para las vacunas que habían sido utilizados o propuestos para los ensayos en humanos. En el caso de la vacuna de Merck rAd5 utilizado en el ensayo STEP, los resultados preclínicos NHP fueron “en el clavo” predecir fielmente la fuerza y ​​la amplitud de las respuestas humanas. En el caso de la vacuna de ADN plásmido Wyeth utilizado en el HVTN-060, sin embargo, la respuesta humana a gag del VIH era mucho más débil que lo que cabría esperar de la respuesta al NHP que SIV gag, probablemente porque los antígenos SIV son mucho más inmunogénica. La vacuna de ADN recombinante de la viruela Sanofi-Pasteur no mostró inmunogenicidad en NHP o humano. Y las vacunas pDNA VRC-Rad5, NHP inmunogenicidad fue comparable a los seres humanos en magnitud, duración y perfiles polifuncionales. En general, entonces, las respuestas NHP fueron muy predictiva de las respuestas humanas a la misma inmunógeno, por lo que es importante que los dos estudios están examinando la misma construcción de vacuna. Otros participantes objetaron que primates no humanos a menudo sobreestiman la respuesta en humanos, por ejemplo en vacunas contra la gripe, pero en el caso de los resultados de Ad35 PHN parecen haber subestimado la respuesta humana.

Letvin también informó que el Laboratorio de Inmunología Celular NHP Core en el Beth Israel Deaconess Medical Center está haciendo un buen progreso hacia Buenas Prácticas de Laboratorio (BPL) el cumplimiento, con la certificación GLP espera en la primavera de 2009. Esto garantizará la calidad y la capacidad de duplicación de todos los ensayos y de datos, y no se requiere si los datos se va a utilizar para las presentaciones regulatorias. También proporciona un recurso vital que permitirá que el campo NHP avanzar más.

Letvin también informó sobre la colaboración CHAVI-Gates para investigar los mecanismos de la protección conferida por la vacunación viva atenuada SIV, y el papel de la respuesta inmune adaptativa. Los resultados hasta la fecha (de Jörn Schmitz) muestran que las células T CD8 + son responsables de la mayor parte de la protección conferida por la vacunación, control particularmente viral, y que los animales que no expresan el MHC-1 alelo Mamu-A * 01 tenían niveles mucho más altos de anticuerpos neutralizantes. Esto llevó a un estudio adicional utilizando animales Mamu-A * 01-negativos, en el que la vacunación protege contra la inoculación SIV incluso cuando se agotaron las células B. Estos resultados demuestran que las células T CD8 + proporcionan protección parcial contra la exposición SIV, que viven resultados de vacunación atenuadas en la protección contra el desafío, y que las respuestas de las células B no juegan un papel importante en la protección de la vacuna viva atenuada. En respuesta a las preguntas, Letvin advirtió que viven estos estudios de vacunas atenuadas son todavía muy en progreso. Quedan muchas preguntas, muchas de las cuales pueden ser respondidas por los ensayos y refinamientos adicionales en el diseño experimental.

RAV miembros acordaron que PNS debe ser utilizado para hacer descubrimientos fundamentales sobre el mecanismo del VIH, no prueba tan preclínico para vacunas humanas y la terapéutica. Tomaron nota de que varios grupos ya han comenzado a trabajar de esta manera, y reconoció que nuevos avances dependerán de un gran aumento en la cría, para que los animales más barato y más disponible. Sin embargo, también sugirieron que debería haber también un sentido más claro de cómo interactúan los diferentes actores, y lo que podrían ser necesarios mecanismos de coordinación y sinergia de sus esfuerzos, si este programa aporta fondos adicionales. Por ejemplo, bierno pone dinero en la investigación básica, a largo plazo, mientras que Gates y IAVI buscan resultados más inmediatos; criadores PHN necesitan el apoyo de ambos grupos, y es importante que no trabajan con propósitos cruzados. Además, es necesario que haya una declaración clara y convincente de la agenda global de investigación en inmunología NHP, incluyendo

También se necesita más trabajo en la correlación de NHP y los resultados humanos, tanto para refinar el modelo NHP ya buscar aplicaciones clínicas de los descubrimientos del NHP. Esta parte de la discusión, probablemente debería incluir más investigadores que trabajan en los seres humanos, aunque sólo sea para aclarar los aspectos complementarios e identificar qué preguntas científicas a preguntar. El campo también necesita más ensayos y reactivos que tienden un puente entre el NHP y humano.

Jack Harding informó que CNRR soporta ocho Centros Nacionales de Investigación de Primates (NPRCs) con un presupuesto total de $ 79 millones en el año fiscal 2008. Esto cubre del 30 al 50 por ciento de sus costos, el resto proviene de los ingresos del programa, sobre todo en las subvenciones forma ofernment. De este total, unos $ 17 millones apoya colonias de macacos, principalmente de origen indio. La base de cada subvención Consejo Nacional Provisional (P51) financia la infraestructura básica del centro – instalaciones de animales y servicios relacionados, los laboratorios centrales (disponibles para los investigadores externos), el bienestar animal, la administración, los proyectos piloto – pero no financia directamente la investigación de tipo R01. En la actualidad la casa NPRCs 28.000 animales, de los cuales 17.000 son macacos rhesus, incluyendo 4.800 libres (SPF) animales de patógenos específicos destinados a la investigación del SIDA. Alrededor del 20 por ciento son parte de las colonias de cría; un número que sólo podría incrementarse si las nuevas instalaciones están disponibles.

Un grupo de trabajo ha determinado que esencialmente no hay reserva de origen indio macacos rhesus, ya sea SPF SPF o no. Para aumentar su número, tenemos que considerar la expansión de las colonias de cría, la búsqueda de nuevas fuentes, reservando los macacos de origen indio para la investigación del SIDA, la construcción de una central de reserva de animales, y determinar si se necesitan animales SPF. Todas estas alternativas sería problemático en una época de presupuestos planas, pero mucho se puede lograr mediante una mejor gestión de colonias, la detección genética y la banca genoma, y ​​actividades del consorcio que disminuyen las redundancias. Sin embargo, será imposible para ampliar las colonias de SPF rhesus y otros primates no humanos con el aumento de la financiación para la construcción de instalaciones. Theernment Oficina de Investigación del SIDA (OAR) ha proporcionado suplementos para la construcción de instalaciones de cría en el año fiscal 2007 y el año fiscal 2008.

En respuesta a las preguntas, Harding añadió que se necesitan tres o cuatro años para conseguir un mayor número de animales en la tubería. El Consejo Nacional Provisional actualmente tiene alrededor de 4 por ciento de exceso de espacio de cría, pero no hay espacio de contención exceso. Pueden reproducirse tipos de MHC específicos (por ejemplo, Mamu-A * 01 positivo o negativo) si es necesario, y los centros ya están secuestrando controladores de élite.

Ronald Desrosiers proporciona una visión histórica de los estudios PHN vacuna viva atenuada, que se realizan con las cepas de virus (en gran medida sobre la base de SIV-239) en el que la eliminación de una parte del genoma produce un virus con virulencia reducida. Varios factores pueden afectar a los resultados de la vacunación, incluyendo el MHC del receptor, el tamaño del inóculo y la salud del receptor al día cero. Sin embargo, mientras que otros enfoques de vacunas han logrado en el mejor de una reducción de 1,5 log en la carga viral, las vacunas vivas atenuadas o una reducción 4.0- 5.0-log frente a la exposición homóloga. Sin embargo, esta protección no se extiende a otras cepas de SIV, y tiende a debilitarse con el tiempo, rara vez persiste hasta cuatro años. Otros experimentos tienen resultados contradictorios producto – el título de anticuerpos puede o no puede afectar a la protección, la persistencia puede o puede no ser importante, las células CD8 + puede o no puede desempeñar un papel.

Correlatos de los estudios de protección en el modelo de virus vivos atenuados SIV

En respuesta a las preguntas, Desrosiers admitió que los investigadores podrían no estar recibiendo las respuestas que buscan porque no están haciendo las preguntas correctas. Podría ser útil para hacer otro experimento en el que tratan de lograr inmunidad esterilizante, o proporcionar un segundo hace de virus atenuado con la esperanza de un efecto de refuerzo. Además, la protección parece debilitar con el aumento de la atenuación de la cepa de la vacuna. Tanto las respuestas celulares y humorales son propensos a estar involucrados.

Paul Johnson señaló a estas preguntas como ejemplos de lo compleja que los experimentos de virus vivos atenuados pueden ser. La mayoría de estos estudios han sido relativamente crudo y de poca potencia, y que probablemente necesitará un enfoque de biología de sistemas con el fin de entender todas las variables en el trabajo

Varios estudios sugieren que tanto las respuestas de células CD8 + y anticuerpos neutralizantes contribuyen a la inmunidad protectora después de la vacunación viva atenuada. Estudios más recientes de protección de la mucosa frente a la estimulación vaginal sugieren que la protección se ve afectada por varios factores, entre ellos genotipo del huésped, el desafío de stock y la vía de desafío. Además, varios mecanismos efectores inmunes parecen actuar en concierto para mediar en la protección. Como resultado, las correlaciones de la cinética de retraso de protección aún no se han definido, a pesar de la estimulación continua por la Bolsa de desafío parece desempeñar un papel en la mediación de la inmunidad protectora.

Louis Selector describe las actividades del Consorcio atenuada en vivo, una colaboración entre Gates-e investigadores financiados por la IAVI para determinar los mecanismos que contribuyen a vivir protección de la vacuna atenuada mediada por SIV. Ellos han tomado tres enfoques diferentes

El laboratorio de selector es responsable de las partes 1 y 3. La parte 1 implicará un total de 120 animales que recibirá la evaluación integral de los recursos genéticos, virológicos, las variables inmune innata y adaptativa. En la actualidad es de 40 días en la primera cohorte de 15 animales, y el análisis preliminar ha identificado 139 genes cuya expresión es significativamente diferente después de la vacunación. Muchos de estos genes están asociados con factores de transcripción, lo que indica que los resultados de vacunación en un cambio profundo y específico en la regulación de genes de acogida, pero los investigadores aún no saben el significado de la pauta. Parte 3 se centra en el uso de citomegalovirus (CMV) como un vector que imita viven atenuada SIV en su inducción preferencial de la “memoria” efector respuestas de células T -dominante. En las primeras pruebas, los vectores CMV rhesus con inserciones de SIV fueron capaces de infectar de forma permanente macacos tanto ingenuas e inmunológico, el establecimiento de una respuesta de células T robusto y de larga duración a los insertos de SIV. Esta respuesta de células T específica SIV era decididamente “efectoras de memoria” en el fenotipo y función, y se retrasó con éxito o infección inhibida por repetida, desafío rectal en dosis bajas. Cuando se produjo la infección, sin embargo, esta respuesta fue menos eficaz en la supresión de la carga viral, pero no empeorar la infección. Es evidente que se necesitan más desarrollo y experimentación, pero estos resultados sugieren fuertemente que las respuestas sesgadas-TEM pueden disminuir la incidencia de la infección por VIH después del contacto sexual.

En respuesta a las preguntas, Picker, dijo que es difícil medir las células efectoras en el tejido rectal, pero le gustaría recibir ideas o propuestas para formas de medirla. Sugirió que la inmunidad esterilizante proceden en parte de los cambios en el microambiente local que evitan que el virus va sistémica. Él no está seguro de dónde CMV está expresando anticuerpos – posiblemente en el bazo? Selector dijo que Gates está apoyando a 78 por ciento de este trabajo, IAVI 22 por ciento, y que cada investigador es muy consciente de lo que hacen los demás. Son cuidadosos para evitar la superposición, llenar los vacíos, y buscar la complementariedad.

Matthew Reynolds presentó resultados de un estudio en el que los macacos que se caracterizan por el MHC fueron vacunados con virus vivos atenuados nef SIVmac239Δ y luego recibieron una estimulación heteróloga con SIVmacE660, que se diferencia de 239 en alrededor del 15 por ciento de su genoma. En este caso, las células T inducidas por la vacunación fueron efectivos en el control de la infección temprana, pero no controlar la replicación viral en el largo plazo. Cuando los investigadores analizaron el perfil de MHC frente al control viral, encontraron que tanto B08 y B17 controlan temprano, pero se desvanecieron. Los estudios futuros estudiar el efecto del perfil de la anfitriona MHC sobre la inmunidad inducida por el virus vivo atenuado contra la estimulación homóloga y heteróloga a continuación.

Justin Greene describe los estudios de transferencia adoptiva de Mauricio de origen macacos cynomolgus (MCM). En el modelo de ratón, la transferencia adoptiva puede transmitir la inmunidad de los animales vacunados para ingenuos. No ha habido ningún equivalente en primates, sin embargo, debido a que las células transferidas se borran dentro de horas después de la transferencia. In vitro, sin embargo, un partido de MHC es lo mismo que una transferencia autólogo. MCM son una población genéticamente aislada con sólo siete haplotipos, por lo que es fácil de identificar, los individuos no emparentados del MHC. Este recurso NHP hace que sea posible para poner a prueba la viabilidad de la transferencia adoptiva emparejado-MHC de animales vacunados con los animales no tratados previamente, un modelo que también podría ser posible en los seres humanos. El desarrollo de este modelo se encuentra todavía en los primeros días, y los investigadores todavía están tratando de determinar el tipo de célula óptima (incluyendo antígenos menores) y el número de células (inóculo), pero los primeros resultados muestran que las PBMC transferidos entre no relacionados macacos-coincide con MHC persisten durante al menos 14 días y son objeto de tráfico desde la sangre a los tejidos linfoides periféricos dentro de las 12 horas de transferencia. IAVI está desarrollando un estudio piloto para ver si esta técnica se puede utilizar para transferir las células T, y, posiblemente, la inmunidad, así.

RAV miembros preguntaron si las PBMC transferidos a casa serían tejidos de la mucosa, fueron la protección es más necesaria; tal vez los experimentos podrían repetirse utilizando células de la mucosa para la transferencia. MCM se diferencian de los macacos rhesus en su respuesta a SIV, incluyendo tanto la tasa de infección y el punto de ajuste. transferencias masivas mixtos representan la mejor manera de validar el modelo y observar la protección; a continuación, los investigadores pueden descomponer los componentes de la transferencia. Certainly it will be worth following the progress of this research, if only to find out what can and can’t be done.

Dr. Hunter asked members to focus discussion on resource needs in NHP research and gaps in live attenuated virus research. One member suggested that there is a need to ensure the quality of SIV stocks, especially challenge virus, and to ensure that what happens in the NHP model truly mimics what happens in HIV infection. This might mean reducing the size of the challenge inoculums; repeated low-dose challenge is a step in right direction. Another suggested that the focus of research should be on aborting a productive infection, not merely controlling it. Sterilizing control certainly seems to be the goal of most NHP research. Ironically, AIDS therapy seems to moving in the opposite direction, controlling viral load rather than killing the virus.

Discusión

In terms of the number of NHPs needed, that depends entirely on how many it will take to answer the fundamental questions. When polio was the target, it was easy to do 2,000 animals in Puerto Rico, but Louis Picker’s 120-animal study is enormous in today’s environment. Financial and political constraints make it more important than ever that other AIDS researchers help the NHP community make the case for the value of the NHP model and the need for additional resources. The high priority of an HIV vaccine, and the recent emphasis on NHP models, are helpful in this regard.

More research is needed on persistent vectors, and the NHP model is an ideal testbed for this work. It would be highly desirable to find a system that would “preposition” effector cells without stimulating CD4+ proliferation; here again the NHP model is an invaluable opportunity to dissect the phenomenon in exquisite detail. Increased dialogue between the NHP and human communities can only reveal additional opportunities for cross-fertilization.